Главная / Молекулярная онкология

Молекулярная онкология


Результаты экспериментов по трансфекции клеток NIH ЗТЗ также подтверждают данное предположение. Только эти клетки трансформируются активированным одиночным Ha-ras-геном с такой высокой эффективностью, и причина подобного феномена в пренеопластическом состоянии указанных клеток. Как полагают, в результате длительного культивирования они уже прошли более половины пути трансформации, в частности стадию иммортализации и некоторые другие, осуществляемые рядом эндогенных онкогенов,…


Трансформирующий потенциал рестрикционных фрагментов ДНК опухолей мышей и человека в культуре клеток NIH ЗТЗ был идентичным. Эти данные свидетельствуют о присутствии и активации в указанных опухолях родственных трансформирующих генов типа mam или tx-4. Основываясь на данных по чувствительности трансформирующих последовательностей к эндонуклеазам рестрикции и на их сопоставлении с физической картой протоонкогена c-Ha-ras рака мочевого пузыря,…


Трансфекция монослоя REF препаратом онкогена Ha-ras не приводила, как это имело место в опытах с NIH ЗТЗ-фибробластами, к формированию очагов трансформации клеток. Подобные условия трансфекции онкогена в системах NIH ЗТЗ или rat 1 приводили к формированию сотен очагов трансформации монослойных культур. Специальные опыты показали, что результаты трансфекции зависят не столько от трансформирующих свойств онкогена Ha-ras,…


Опухолевые клетки, из которых выделяются препараты ДНК, содержащие трансформирующие гены, существенно отличаются от клеток, используемых в качестве реципиентных в экспериментах по трансфекции. Так, онкогены, происходящие из перечисленных в табл. 14, 15, 16 опухолей человека и животных, могут трансформировать мышиные клетки NIH ЗТЗ. Это является определенным доказательством того, что тот или иной конкретный онкоген, например EJ-c—Ha-ras,…


Реципиентные клетки после трансфекции указанным препаратом ДНК приобретали способность к субстратиезависимой пролиферации, которая сохранялась свыше 30 пассажей клеток. Трансформирующий эффект препарата ДНК MOLT-4 снимался обработкой ДНКазой и некоторыми эндонуклеазами рестрикции, например Bgl II и ВатН I. Следует отметить, что в клеточной линии MOLT-4 ранее в экспериментах по трансфекции клеток NIH ЗТЗ был идентифицирован трансформирующий ген…


У клеток грызунов (гетерологическая модельная система) есть важное преимущество — в них значительно легче обнаружить методами молекулярной гибридизации перенесенные и функционирующие онкогены. Эти гены, как правило, по сайтам рестрикции отличаются от эндогенных аллелей протоонкогенов. Следует учитывать и тот факт, что некоторые онкогены могут действовать как рецессивные или как слаботрансформирующие аллели, невыявляемые в используемой в настоящее…


Единичное генетическое событие (точковая мутация), приводящее к образованию трансформирующих генов семейства ras, само по себе еще недостаточно для достижения злокачественного перерождения нормальных фибробластов. Необходимо другое повреждение (точная природа которого еще не установлена), способное к кооперированию с трансформирующим геном. В этом случае наступает кажущаяся «одностадийная» трансформация фибробластов, что в ее истинной сущности не противоречит общей модели…


Группой неидентифицированных трансформирующих генов, также не связанных с онкогенами ретровирусов млекопитающих, являются онкогены нейробластом и глиобластом крыс, индуцированных трансплацентарно этилнитрозомочевиной [Shih С-et al., 1981; Huh N. et al., 1983]. После 2—3 циклов трансфекции клеток NIH ЗТЗ препаратами ДНК, изолированными из нейро-и глиобластом, возникают очаги независимой от субстрата пролиферации, которые уже в 3-м и 4-м циклах…


Различные механизмы активации клеточных протоонкогенов в трансформирующие онкогены рассмотрены в одном из предыдущих разделов этой книги. Поэтому здесь мы опишем лишь один дополнительный биологический феномен, также модифицирующий трансформирующие гены с далекоидущими функциональными последствиями. Мы имеем в виду процесс метилирования ДНК и его роль в экспрессии онкогенов. Благодаря большому числу новых работ с использованием методов генной…


Метилирование цитозина в последовательности 5-ЦГ осуще-ствляется путем переноса метильной группы СНз от аденозил-метионина с помощью метилазы (метилтрансферазы) в процессе репликации ДНК. При этом донор СН3-группы, S-аденозилметио-нин, превращается в S-аденозилгомоцистеин. Аналогичным образом происходит процесс превращения аденина в 6-метиламинопурин. Метилтрансфераза функционирует на дуплицирующейся цепи ДНК таким образом, что вновь синтезированная нить ДНК в отношении степени метилирования становится…