Молекулярная онкология
В опытах по трансфекции клеток NIH ЗТЗ препаратами ДНК из куриной В-клеточной лимфомы, G. Goubin и соавт. (1983) выявили трансформирующий ген, неидентичный ранее известным онкогенам остротрансформирующих ретровирусов животных. Позже A. Diamond и соавт. (1983) показали, что такой же тип трансформирующего гена присутствует в 6 клеточных линиях лимфомы Беркитта. В связи с тем, что указанные неопластические…
Отсутствие тканеспецифичности в активации протоонкогенов семейства генов ras и туе очевидно. Однако это положение вряд ли может быть распространено на все известные онкогены. Некоторые новые и пока малоохарактеризованные онкогены, как было показано, специфически ассоциированы с конкретным типом опухолей. К ним относятся онкоген лимфом кур и человека B-lym, стадиеспецифический онкоген T-lym, а также онкогены mam (tx-4)…
Размер трансформирующего гена B-lym человека определен. Он меньше 0,95 т. п. о. Активация этого гена в клетках лимфомы Беркитта не связана с амплификацией или генными перестройками. В контексте трансформации В-лимфоцитов следует рассматривать также амплификацию и транслокацию гена с-тус из хромосомы 8 в хромосому 14 или 22, также часто встречающуюся в лимфомах Беркитта. Вероятно, в неопластический…
Изучение клеточных онкогенов привело к обнаружению и выделению ряда важных генов, участвующих в многостадийном превращении нормальных клеток в опухолевые. Тем не менее данных об активации протоонкогенов, их локализации в хромосомах и продуктах экспрессии все еще недостаточно для понимания всего комплекса молекулярных событий, имеющих место при образовании опухолей в организме. Спонтанный или индуцированный химическими канцерогенами туморогенез…
М. Lane и соавт. (1982) первыми обнаружили трансформирующие свойства препаратов ДНК из Т- и В-клеточных лимфом мышей и человека в культуре клеток NIH ЗТЗ. В экспериментах по трансфекции авторы установили, что трансформирующий потенциал рестрикционных фрагментов испытуемых препаратов ДНК различен. Использование эндонуклеаз рестрикции и получаемых с их помощью фрагментов ДНК позволило достаточно точно определить родство трансформирующих…
Результаты экспериментов по трансфекции клеток NIH ЗТЗ также подтверждают данное предположение. Только эти клетки трансформируются активированным одиночным Ha-ras-геном с такой высокой эффективностью, и причина подобного феномена в пренеопластическом состоянии указанных клеток. Как полагают, в результате длительного культивирования они уже прошли более половины пути трансформации, в частности стадию иммортализации и некоторые другие, осуществляемые рядом эндогенных онкогенов,…
Трансформирующий потенциал рестрикционных фрагментов ДНК опухолей мышей и человека в культуре клеток NIH ЗТЗ был идентичным. Эти данные свидетельствуют о присутствии и активации в указанных опухолях родственных трансформирующих генов типа mam или tx-4. Основываясь на данных по чувствительности трансформирующих последовательностей к эндонуклеазам рестрикции и на их сопоставлении с физической картой протоонкогена c-Ha-ras рака мочевого пузыря,…
Трансфекция монослоя REF препаратом онкогена Ha-ras не приводила, как это имело место в опытах с NIH ЗТЗ-фибробластами, к формированию очагов трансформации клеток. Подобные условия трансфекции онкогена в системах NIH ЗТЗ или rat 1 приводили к формированию сотен очагов трансформации монослойных культур. Специальные опыты показали, что результаты трансфекции зависят не столько от трансформирующих свойств онкогена Ha-ras,…
Опухолевые клетки, из которых выделяются препараты ДНК, содержащие трансформирующие гены, существенно отличаются от клеток, используемых в качестве реципиентных в экспериментах по трансфекции. Так, онкогены, происходящие из перечисленных в табл. 14, 15, 16 опухолей человека и животных, могут трансформировать мышиные клетки NIH ЗТЗ. Это является определенным доказательством того, что тот или иной конкретный онкоген, например EJ-c—Ha-ras,…
Реципиентные клетки после трансфекции указанным препаратом ДНК приобретали способность к субстратиезависимой пролиферации, которая сохранялась свыше 30 пассажей клеток. Трансформирующий эффект препарата ДНК MOLT-4 снимался обработкой ДНКазой и некоторыми эндонуклеазами рестрикции, например Bgl II и ВатН I. Следует отметить, что в клеточной линии MOLT-4 ранее в экспериментах по трансфекции клеток NIH ЗТЗ был идентифицирован трансформирующий ген…
