Трансфекция монослоя REF (Реципиентные клетки)

Реципиентные клетки после трансфекции указанным препаратом ДНК приобретали способность к субстратиезависимой пролиферации, которая сохранялась свыше 30 пассажей клеток. Трансформирующий эффект препарата ДНК MOLT-4 снимался обработкой ДНКазой и некоторыми эндонуклеазами рестрикции, например Bgl II и ВатН I.

Следует отметить, что в клеточной линии MOLT-4 ранее в экспериментах по трансфекции клеток NIH ЗТЗ был идентифицирован трансформирующий ген ras [Eva A. et al., 1983]. Возможно, что дальнейшие опыты с этой линией клеток позволят установить роль онкогенов семейства ras в трансформации первичных фибробластов человека препаратом ДНК MOLT-4.

В соответствии с идеей недостаточности для полной трансформации клеток одиночного гена, работающего лишь на конкретном отдельном этапе злокачественной трансформации клетки, эти неудачи становятся понятными. Тем не менее использование в качестве реципиентных клеток NIH ЗТЗ, отличающихся гиперчувствительностью к трансформации, можно рассматривать как несомненную удачу, приведшую к выявлению целого ряда онкогенов и их последующей идентификации.

Таким образом, трансформирующие свойства онкогена Ha-ras оказались существенно ограниченными в случае испытания в клетках REF. Однако если в качестве реципиентных клеток использовались перевивные или иммортализованные («бессмертные») культуры, такие как NIH ЗТЗ или rat 1, то последующее введение в эти культуры онкогена сопровождалось их одностадийной трансформацией в полностью злокачественное состояние.

Иными словами, одним из необходимых условий перевиваемости или иммортализации клеток в условиях культуры является активизация клеточной функции, способной кооперировать с геном ras в формировании полностью трансформированного фенотипа.

«Молекулярная онкология»,
И.Ф. Сейц, П.Г. Князев

• Лечение онкологии. Методики и новейшие методы
• Заключение
• Заключение (Итоги)
• Заключение (Теория химического канцерогенеза)
• Главный успех онковирусологии наших дней
• Тезисы докторской дессертации И. М. Сеченова
• Молекулярная биология
• Некоторые методические вопросы принципиального характера (Культура ЗТЗ-клеток)
• Сводка новых данных («homoe boxes»)
• Опыты с комплементацией онкогенов и схема «многоступенчатого» канцерогенеза
• Сводка новых данных (Независимость раковых клеток от ФР)
• 2 молекулярные ступени в процессе канцерогенеза
• Сводка новых данных (Функция протоонкогенов)
• Использование методов переноса генов и молекулярного клонирования
• Сводка новых данных (Происхождение протоонкогена c-sis и гена РФТ)
• Сводка новых данных
• Рецепторная роль онкобелков суперсемейства src