Клеточные онкогены
Рассмотрение в данном разделе точковых мутаций обособленно от других путей активации протоонкогенов не означает, что они являются единственным генетическим механизмом, осуществляющим превращение нормальных клеточных генов в онкогены, в то время как изложенные выше имеют совершенно другую природу. Это не так. Произведенное нами подразделение процессов активации в известной степени носит формальный характер и служит облегчению их…
S. Rasheed и соавт. (1983) определили нуклеотидную после-довательность онкогена штамма Рашид вируса саркомы крыс (RaSV). Онкоген кодирует трансформирующий белок р29 (29 кд), отличающийся от иммунологически родственного ему белка р21 вируса мышиной саркомы Харвея по структуре N-конца и тем, что имеет дополнительные мутации на карбоксиконце. Крысиный саркомный вирус штамма :Рашид интересен в том отношении, что возник…
К типам мутаций автор относит: изменения числа наборов хромосом; изменения числа отдельных хромосом; перестройки хромосом (сегментные мутации: делении, дупликации, инверсии, транслокации, транспозиции); генные (или точечные) мутации. Первые 3 типа мутаций обозначают под общим названием «хромосомные аберрации». Приведенные цитаты из авторитетных источников говорят о том, что практически все рассмотренные нами выше механизмы активации клеточных протоонкогенов представляют…
К. Shimizu и соавт. (1983) анализировали структуру онкогена Ki-ras в линии клеток Calu-1 карциномы легкого человека. По их данным, гомолог вирусного онкогена Кирстен-ras (v-Ha-ras), найденный в клеточной линии Calu-1 карциномы легкого человека, имеет интрон-экзонную структуру, сходную с таковой человеческого гомолога вирусного гена Харвей-ras (v-Ha-ras). Второй, потенциально 4-й кодирующий экзон присутствует в Ki-ras-гене человека, и сходные…
Точковые мутации в канцерогенезе привлекли особое внимание в связи с серией статей по активации онкогенов, появившихся в конце 1982 г. Проведенные исследования особенно примечательны в том отношении, что впервые в истории онкологии приурочили сложнейшее биологическое явление — трансформацию и туморогенез — к конкретному простому молекулярному акту — замене одного нуклеотида ДНК другим. Исчерпывается ли указанным…
Наблюдается значительная консервативность всей аминокислотной последовательности между гомологичными ras-генами у отдаленных видов животных. Так, Ha-ras-ген человека отличается от вирусного Ha-ras-гена, имеющего крысиное происхождение, лишь тремя (из 189) остатками аминокислот. Сходно с этим человеческий Ki-ras-ген (состоящий из 4 экзонов: I, II, III и IV) отличается от вирусного Ki-ras-гена, также имеющего крысиное происхождение, лишь 7 из 189…
Обработкой рестрикционными эндонуклеазами ДНК опухоли и гомологичной нормальной ткани расщепили на фрагменты, с помощью техники трансфекции идентифицировали сегменты, содержащие онкоген и протоонкоген, и клонировали те и другие. Таким образом, исследователи располагали клонированными вариантами обоих генов, поэтому определение характера мутации и ее точной локализации при современном уровне развития молекулярной биологии и генной инженерии не представляло непреодолимых…
Протоонкоген и онкоген (а) расщепляли эндонуклеазами в одном и том же месте (б) и сегменты лигировали (в) перекрестно. Рекомбинанты испытывали на трансфекционную активность. «Вырезали» более мелкие фрагменты (г, д). В наименьших фрагментах (350 нуклеотидов) устанавливали последовательность оснований и выявляли точку мутации. Специфические сегменты, «вырезанные», как указано выше, из двух генов, соединялись с помощью фермента ДНК-лигазы…
Превращение протоонкогена клеток мочевого пузыря человека в онкоген [Weinberg R., 1983] Поиск мутагенного повреждающего эффекта, активирующего протоонкогены клетки, не был случайным. Известно много работ по химическому канцерогенезу, указывающих на устойчивую корреляцию канцерогенной активности соединений с их мутагенной способностью [McCann J. et al., 1975; McCann J., Ames В., 1976]. Это свидетельствует о том, что ДНК является…
Первые указания на присутствие в опухолевых ДНК онкогенно-активных последовательностей были получены в опытах по изучению чувствительности биологической активности ДНК к обработке сайтспецифическими эндонуклеазами [Lane M. et al., 1981; Shilo В., Weinberg R., 1981]. С. Tabin и соавт. (1982) провели генетическое картирование функционально измененной области онкогена. Для этого они осуществили in vitro гомологичную рекомбинацию между клонами…
