Клеточные онкогены
Родство вирусных и клеточных онкогенов очень велико. Например, нуклеотидные последовательности v-mos и c-mos (1157 нуклеотидов) различаются только в 25 позициях, а дедуцированная последовательность аминокислотных последовательностей вирусного и клеточного белков — только в 11 аминокислотных остатках [Van Beveren С. et al., 1982]. Вирусный и клеточный варианты myb-генов столь же близки: среди 1197 нуклеотидов различаются лишь 15,…
Исследователи отмечают как сходство, так и определенные различия онкогенов ретровирусов и их клеточных предшественников. Клеточное происхождение вирусных онкогенов было убедительно подтверждено, в частности, молекулярной гибридизацией кДНК- проб (проб ДНК, комплементарных ретровирусной геномной РНК), приготовленных с помощью обратной транскриптазы, и РНК вирусов сарком Харвея, Кирстена, а также Молони, с клеточной нуклеиновой кислотой. После этого в нормальных…
Только с освоением молекулярного клонирования структурное родство клеточных протоонкогенов и вирусных онкогенов стало совершенно очевидным. Начиная с клеточного прототипа вируса саркомы Молони, были клонированы большинство прототипов известных вирусных онкогенов и сравнены с вирусными партнерами в гетеродуплексном анализе, рестрикционно-эндонуклеазным картированием, фингерпринтным анализом и путем установления нуклеотидных последовательностей. Эти сопоставления показали, что те части вирусных онкогенов, которые…
Итак, вирусные онкогены и их клеточные прототипы структурно отличаются друг от друга. В чем это различие заключается и каким образом клеточный ген превращается в вирусный? Современные молекулярно-биологические и молекулярно-генетические данные говорят о том, что многие, если не все, вирусные онкогены отличаются от своих клеточных прототипов в некоторой части генетической информации. Это особенно ясно видно при…
Вирусный ген ВСР, индуцирующий клеточную трансформацию, был назван src (сарк.). Эволюционное происхождение ретровирусных онкогенов было неясно до открытия положения о том, что ДНК как птиц [Stehelin D. et al., 1976], так и млекопитающих [Spector D. et al., 1978] содержат нуклеотидные последовательности, близкородственные (гомологичные) онкогену src ВСР. Обнаружение этих фактов вызвало к жизни два предположения: все…
Информация по этому поводу неоднозначна и противоречива. С одной стороны, все (кроме одного) локусы с-myc в человеческой ДНК являются неполными и могли бы быть нефункциональными псевдогенами; одна из двух копий c-src-гена в ДНК кур и человека имеет, по-видимому, ненормальную структуру, и десятикратная амплификация c-ras Харвея у Mus pohari не сопровождается усилением экспрессии гена, как если…
Онкоген ВСР был первым из идентифицированных онкогенов. Важный шаг в его открытии был сделан J. Martin (Калифорнийский университет), который в 1970 г. идентифицировал температурочувствительный мутант ВСР. Он показал, что температура способна влиять на способность вируса трансформировать клетки в культуре. С помощью изменения температуры оказалось возможным вызывать обратимую инактивацию гена. Если культуры клеток, инфицированные температурочувствительный мутантом,…
Поскольку выявление экспрессии клеточных онкогенов по кодируемым белкам встречало трудности, основным методом исследования этого процесса явилось изучение транскрипции онкогенов. Было установлено, что практически все c-onc-гены транскрибируются в РНК в нормальных и опухолевых клетках. Отмечено лишь одно исключение: не удалось обнаружить транскрипции c-mos. Этот факт вызывает недоумение, учитывая сильную эволюционную консервативность c-mos. Имелись затруднения и с…
Ген src вскоре приобрел еще большую реальность благодаря исследованиям P. Duesberg, С. Weissmann, M. Billeter и J. Coffin. Они работали со штаммами ВСР, изолированными P. Vogt. Эти штаммы являются «делеционными» мутантами, которые потеряли онкоген и поэтому неспособны индуцировать опухоли или трансформировать клетки в культуре. P. Duesberg и С. Weissmann с сотр. фрагментировали геномы «делеционных» мутантов…
На основании исследований транскрипции клеточных онкогенов были сделаны следующие общие заключения [Bishop J., 1983]. Транскрипция с клет,очных генов (с-опс) происходит в различных тканях и у каждого из исследованных видов позвоночных. Транскрипция c-src и с-тус обнаружена также у Drosophila melanogaster. Количества c-onc-специфической РНК в большинстве клеток исключительно малы (около 1 —10 копий на клетку). Функция каждого…
