Молекулярная онкология
Пока неясно, имеют ли продукты экспрессии двух доменов свои специфические мишени трансформации или они действуют в комбинации. Точно известно лишь то, что для трансформации клеток эритроидного пула необходимы оба домена или оба онкогена v-erb. Делеционный мутант AEV, утративший онкоген v-erb A, т. е. способность кодировать полипротеин P75gagerb A, не был способен трансформировать клетки эритроидного пула,…
Два независимых изолята ретровирусов птиц, AMV и Е26, содержат онкоген v-myb [Duesberg P. et al., 1980; Moscovici С et al., 1981]. AEV вызывает острый миелобластный лейкоз, а Е26 — эритроидный лейкоз и, реже, смешанные лейкозы, содержащие эритроидные и миелоидные клетки [Moscovici С. et al., 1981; Bishop J., Varmus H., 1982]. В условиях in vitro оба…
Механизм делеции и эксцизии вирусных генов неизвестен. Остается загадкой, экспрессией каких генов поддерживается раковый фенотип клеток млеко-питающих, утративших весь экзогенный провирус, включая онкоген [Varmus H. et al., 1981]. Таким образом, первая фаза жизненного цикла ретровирусов в клетке заканчивается созданием провируса и его интеграцией в клеточный геном. Доминирует в этом процессе вирускодируемая ферментная система обратной транскрипции…
Ретровирусы в процессе эволюции развили сложный механизм, позволяющий их генам экспресси-роваться в клетке-хозяине. Прежде всего следует отметить различную молекулярную организацию клеточного и вирусного геномов. В эукариотической клетке гены состоят из отдельных цистро-нов (экзонов), прерывающихся некодирующими областями (интронами). Провирусы, напротив, представляют собою мультицистронную генетическую единицу, в которой индивидуальные цистроны не прерываются некодирующими участками. Это утверждение пока…
Транскрипция ДНК-провируса после его образования осуществляется клеточной РНК-полимеразой II, ответственной также за синтез клеточных иРНК. Несколько исследовательских групп установили, что в и B-области LTR провируса находятся промотер и сайт инициации синтеза вирусных РНК [Yamamoto Т. et al., 1980; Swanstrom R. et al., 1981]. Последовательности, имеющие отношение к началу транскрипции провируса, ТАТАААА, обнаружены также в клеточных…
Полипротеин (Pr76gag) модифицируется путем фосфорилирования и «разрезания» протеазами на мелкие белки сердцевины (кора) вириона: NH2—р19-р°-р27-р12-р15 — СООН [Eisenman R., Vogt V., 1978; Shealy D. et al., 1980]. Первичным продуктом гена pol является также большой полипротеин (Prl80gaBpo1), содержащий детерминанты гена gag,— Pr76gag. Информационная РНК для Prl80gagpo1 (ДНК-полиме-разы) структурно не отличается от иРНК гена gag. Механизм, при…
Синтез опс-специфических иРНК и кодируемых ими белков будет подробно рассмотрен в следующем разделе этой главы. Вируспродуцирующие клетки синтезируют два типа вирусных РНК- иРНК первого типа служат матрицей для трансляции вирусспецифических белков, участвующих в компоновке вириона. Другой тип — геномная РНК, которая в дальнейшем может упаковываться в вирусное потомство. Выше было отмечено, что структурные различия среди…
Вирусы, обладающие one-последовательностями (онкогенами), были изолированы как минимум от шести видов животных. Сравнение one-областей генома этих вирусов при помощи молекулярной гибридизации, фингерпринтного анализа олигонуклеотидов и пептидного картирования соответствующих онкобелков показало, что более 20 неродственных клеточных генов являются донорами (прародителями) вирусных онкогенов [Cooper G., 1982; Bishop J., 1982, 1983; Weinberg R., 1982; Land H. et al.,…
Онкогены Источникизолирования Животное-носитель Индуцируемая опухоль или злокачественный процесс Локализация в хромосомах Онкобелки человека мыши Молекулярная масса(кд) и генетическая структура Локализация Свойства src Вирус саркомы Рауса Куры Саркома 20 2 pp60src Плазматическая мембрана Фосфотирозинкиназа yes Вирус саркомы Ямагуши Куры Саркома — — Р90gag-yes Плазматическая мембрана Фосфотирозинкиназа fps (fes) Вирус саркомы Фуджинами Куры Саркома 15gq 24—25 7…
Для изучения ретровирусных онкогенов используют различные подходы, которые основываются прежде всего на особенностях структуры вирусного генома. К ним относятся генетический анализ различных мутантов, молекулярная гибридизация, рестрикционное и гетеродуплексное картирование, молекулярное клонирование, определение нуклеотидных последовательностей (секвенирова-ние) анализ РНК-транскриптов в клетках, трансляции геномных и субгеномных молекул РНК, иммунологическое, пептидное картирование и выявление энзиматических свойств онкобелков. Наиболее общим…
