Sac I-фрагменты донорских образцов ДНК

02.02.2011г.

Sac I-фрагменты донорских образцов ДНК рака мочевого пузыря и меланомы оказались идентичными.

Однако нуклеотидные последовательности генома опухолевых клеток человека в первичных трансформантах, возникающих от введения препаратов ДНК EJ, JA-1 (например, клоны клеток EJ-F5, JASA-3), отличаются друг от друга.

Второй цикл трансфекции клеток NIH ЗТЗ сопровождался существенными изменениями структуры трансформирующего гена. В препарате ДНК, изолированной из клона MJ-1, отмечено присутствие дополнительных (к 2,9 т. п. о.) вирусспецифических Sac I-фрагментов размерами 3,4 и 21,0 т. п. о.


Гибридизация Sac 1-фрагментов ДНК первичных
и вторичных трансформантов клеток NIH ЗТЗ
с c-Ha-ras 1 онкогеном (плазмида) pEJ 6,6

Гибридизация Sac 1-фрагментов ДНК первичных и вторичных трансформантов клеток NIH ЗТЗ с c-Ha-ras 1 онкогеном (плазмида) pEJ 6,6

1 — Sac 1 локус онкогена c-Ha-ras в EJ-клетках рака мочевого пузыря человека. Фрагмент размером 2,9 т. п. о. содержит последовательности, комплементарные v-Ha-ras-онкогену; 2 — ДНК первичных трансформантов EJ-F5, индуцируемых EJ ДНК; 3 — ДНК клеток NIH ЗТЗ, в данной постановке эксперимента проба pEJ 6,6 не выявляет вирусспецифические последовательности, комплементарные эндогенному мышиному с-На-ras-протоонкогену; 4 — Sac 1 локус протоонкогена c-Ha-ras 1 в ДНК JA-1 клеток злокачественной меланомы человека; 5 — ДНК первичных трансформантов JASA-3, индуцируемых ДНК JA-1; 6 — ДНК вторичных трансформантов MJ-1, возникающих от ДНК JA-1 (все три фрагмента: 21 т. п. о., 3, 4 т. п. о. и 2,9 т. п. о. комплементарны v-Ha-ras, что определено пробой pBS-9; 7 — Sac I-локус протоонкогена c-Ha-ras 1 в ДНК LA-N-1 (клетки нейробластомы человека); 8 — ДНК первичных трансформантов LASA-1, индуцируемых ДНК LAN-1; 9 — Sac I-локус протоонкогена c-Ha-ras 1 в ДНК SK-BR-3 (клетки рака молочной железы человека); 10 — ДНК первичных трансформантов, клон клеток SRSA-1, индуцируемых ДНК SK-BR-3; 11 — Sac 1-локус протоонкогена c-Ha-ras 1 в ДНК HVM (клетки нормальной слизистой оболочки желудка человека); 12 — Sac I-локус протоонкогена c-Ha-ras 1 в ДНК Са VSt (клетка рака желудка человека). Стрелками обозначены Sac 1-фрагменты донорских препаратов ДНК, содержащих вирусспецифические последовательности, комплементарные онкогену v-Ha-ras 2,9 т. п. о., и фланкирующие последовательности, комплементарные трансформирующему гену EJ-c-Ha-ras 1 5,15 т. п. о. и 6,0 т. п. о.


«Молекулярная онкология»,
И.Ф. Сейц, П.Г. Князев



Смотрите также: