Вирусный онкогенез и его молекулярные основы
В клетках, трансформированных ВСР, продукт гена src ассоциирован с рядом субклеточных компонентов. Исключением в этом отношении является лишь ядро. Большинство молекул pp60vsrc в инфицированных клетках связано с плазматическими мембранами, что было определено методами иммунофлюоресцентной и иммуноэлектронной микроскопии, а также посредством биохимических характеристик клеточных органелл [Willingham M. et al., 1979; Erikson E., Erikson R., 1980; Levinson…
В ряде экспериментальных работ были получены убедительные данные, свидетельствующие о возможности захвата (трансдукции) клеточных последовательностей в вирусный геном при пассировании вируса в культурах клеток. Прежде всего это относится к трансформирующим генам многих ретровирусов. Механизм трансдукции сложен и до конца не изучен. Исходя из имеющихся представлений о структуре провируса, акт захвата клеточных генов, располагающихся рядом с…
Получение многократно очищенного pp60v src позволило приступить к более точному изучению специфических белков-субстратов его энзиматической активности в процессе вирусиндуцированной трансформации. Два таких белка, с молекулярной массой 89 и 50 кд, были идентифицированы в иммунопреципитатах pp60v src [Erikson E., Erikson R., 1980; Oppermann H. et al., 1981]. Оба белка формируют физический комплекс с онкобелком, и этот…
Как уже отмечалось выше, структура провируса и транспозонов прокариот в общих чертах сходна. Однако, в отличие от последних, возможность транспозиции прови-русов экспериментально не подтверждена. Анализ структуры провирусов многочисленных субклонов клеток, инфицированных и трансформированных ретровирусами [Shimotohno К. et al., 1980; Varmus H. et al., 1981], а также большого числа эндогенных провирусных последовательностей отдельных особей различных пород…
Что касается белка с молекулярной массой 89 кд, то он является основным представителем цитоплазматической белковой фракции каждого типа клеток всех позвоночных. В нем не показано каких-либо различий структуры и сайтов фосфорилирования у разных видов животных. В трансформированных ретровирусами клетках белок с молекулярной массой 89 кд фосфорилирован по серину. Этот же белок образует аналогичные комплексы с…
Механизм делеции и эксцизии вирусных генов неизвестен. Остается загадкой, экспрессией каких генов поддерживается раковый фенотип клеток млеко-питающих, утративших весь экзогенный провирус, включая онкоген [Varmus H. et al., 1981]. Таким образом, первая фаза жизненного цикла ретровирусов в клетке заканчивается созданием провируса и его интеграцией в клеточный геном. Доминирует в этом процессе вирускодируемая ферментная система обратной транскрипции…
Ретровирусы в процессе эволюции развили сложный механизм, позволяющий их генам экспресси-роваться в клетке-хозяине. Прежде всего следует отметить различную молекулярную организацию клеточного и вирусного геномов. В эукариотической клетке гены состоят из отдельных цистро-нов (экзонов), прерывающихся некодирующими областями (интронами). Провирусы, напротив, представляют собою мультицистронную генетическую единицу, в которой индивидуальные цистроны не прерываются некодирующими участками. Это утверждение пока…
Транскрипция ДНК-провируса после его образования осуществляется клеточной РНК-полимеразой II, ответственной также за синтез клеточных иРНК. Несколько исследовательских групп установили, что в и B-области LTR провируса находятся промотер и сайт инициации синтеза вирусных РНК [Yamamoto Т. et al., 1980; Swanstrom R. et al., 1981]. Последовательности, имеющие отношение к началу транскрипции провируса, ТАТАААА, обнаружены также в клеточных…
Полипротеин (Pr76gag) модифицируется путем фосфорилирования и «разрезания» протеазами на мелкие белки сердцевины (кора) вириона: NH2—р19-р°-р27-р12-р15 — СООН [Eisenman R., Vogt V., 1978; Shealy D. et al., 1980]. Первичным продуктом гена pol является также большой полипротеин (Prl80gaBpo1), содержащий детерминанты гена gag,— Pr76gag. Информационная РНК для Prl80gagpo1 (ДНК-полиме-разы) структурно не отличается от иРНК гена gag. Механизм, при…
Синтез опс-специфических иРНК и кодируемых ими белков будет подробно рассмотрен в следующем разделе этой главы. Вируспродуцирующие клетки синтезируют два типа вирусных РНК- иРНК первого типа служат матрицей для трансляции вирусспецифических белков, участвующих в компоновке вириона. Другой тип — геномная РНК, которая в дальнейшем может упаковываться в вирусное потомство. Выше было отмечено, что структурные различия среди…
