Первый трансформирующий ген человека (Последующий сравнительный анализ)
Последующий сравнительный анализ и сопоставление плазмид, несущих онкоген pEJ-6,6, а также онкоген рТ24, с уже известными вирусными онкогенами, позволили установить, что обнаруженные и изолированные человеческие онкогены принадлежат к типу трансформирующих генов, родственных c-Ha-ras 1 [Goldfarb M. et al., 1982; Parada L. et al., 1982; Taparowsky E. et al., 1982].
Полностью генетический локус протоонкогена c-Ha-ras 1 (вирусспецифическая область, комплементарная v-Ha-ras-онко-гену) в донорских препаратах ДНК, а также первичных и вторичных трансформантах представлен рестрикционным Sac 1-фрагментом размером 2,9 т. п. о. [Goldfarb M. et al., 1982; Reddy E. et al., 1982]. При этом генетический локус c-Ha-ras 2 протоонкогена может быть выявлен в Sac 1-фрагменте размером 21,0 т. п. о. в «мягких» условиях гибридизации [Chang E. et al., 1982].
Методом А. Махат и W. Gilbert (1977) были определены нуклеотидные последовательности онкогена Т24 [Reddy E., 1983], в последующем методом гетеродуплексного анализа — генетическая структура этого гена [Capon D. et al., 1983]. В нем были идентифицированы 4 кодирующие области (экзоны), которые разобщены тремя некодирующими последовательностями нуклеотидов — нитронами [Ellis R. et al., 1980]. Каждая кодирующая область гена c-Ha-ras 1 рака мочевого пузыря человека содержит сигналы для сплайсинга иРНК онкогена, а на З-конце 4-го экзона имеет терминирующий кодон функционирования ДНК-зависимой РНК-полимеразы и сигнал полиаденирования иРНК [Chang E. et al., 1982; Reddy E. et al., 1982, 1984].
Клонированный из ДНК клеточной линии Т24 онкоген c-Ha-ras 1 трансформировал клетки NIH ЗТЗ с высокой эффективностью, в то время как его нормальная аллель из нормальных клеток плаценты человека в параллельных экспериментах по трансфекции была неактивна.
«Молекулярная онкология»,
И.Ф. Сейц, П.Г. Князев
Смотрите также:
- Лечение онкологии. Методики и новейшие методы
- Тезисы докторской дессертации И. М. Сеченова
- Молекулярная биология
- Заключение
- Заключение (Итоги)
- Заключение (Теория химического канцерогенеза)
- Главный успех онковирусологии наших дней
- Сводка новых данных (Трансдуцин)
- Сводка новых данных (Онкобелок p21cras)
- Некоторые методические вопросы принципиального характера
- Сводка новых данных (Метилирование усилителей)
- Некоторые методические вопросы принципиального характера (Культура ЗТЗ-клеток)
- Сводка новых данных («homoe boxes»)
- Опыты с комплементацией онкогенов и схема «многоступенчатого» канцерогенеза
- Сводка новых данных (Независимость раковых клеток от ФР)
- 2 молекулярные ступени в процессе канцерогенеза
- Сводка новых данных (Функция протоонкогенов)