D. Stehelin пошел по оригинальному пути: он создал так называемую «пробу» — радиоактивную ДНК, скопированную исключительно с src-гена с помощью обратной транскриптазы. Скопированная с src-гена ДНК служила в качестве зонда в поиске клеточной ДНК, имеющей нуклеотидную последовательность, идентичную (или очень сходную) таковой src. Поиск проводился с помощью молекулярной гибридизации, в которой цепи нуклеиновой кислоты (ДНК…
Одно время полагали, что онкогенное действие вирусов могло бы рассматриваться как побочное проявление активности других вирусных генов, чьей главной функцией является участие в продукции новых вирусных частиц. Теперь ясно, что репликация ретровирусов протекает нормально в отсутствие онкогенов. Как в этом случае объяснить широкое распространение онкогенов в ретровирусах и их очевидную «консервацию» в ходе эволюции? Десятилетние…
Считалось, что узнать такой белок, понять, как он действует, — значит раскрыть механизм онкогенеза. Как усложнилась эта ортодоксальная схема в ходе дальнейших исследований, мы укажем позже. Белок, кодируемый геном src, стал известен благодаря работам R. Erickson и соавт. (1980), которые идентифицировали белок, синтезирующийся в пробирке по «инструкциям» генома дикого типа ВСР, но не образующегося в…
Ген src вскоре приобрел еще большую реальность благодаря исследованиям P. Duesberg, С. Weissmann, M. Billeter и J. Coffin. Они работали со штаммами ВСР, изолированными P. Vogt. Эти штаммы являются «делеционными» мутантами, которые потеряли онкоген и поэтому неспособны индуцировать опухоли или трансформировать клетки в культуре. P. Duesberg и С. Weissmann с сотр. фрагментировали геномы «делеционных» мутантов…
Онкоген ВСР был первым из идентифицированных онкогенов. Важный шаг в его открытии был сделан J. Martin (Калифорнийский университет), который в 1970 г. идентифицировал температурочувствительный мутант ВСР. Он показал, что температура способна влиять на способность вируса трансформировать клетки в культуре. С помощью изменения температуры оказалось возможным вызывать обратимую инактивацию гена. Если культуры клеток, инфицированные температурочувствительный мутантом,…
Вирусный ген ВСР, индуцирующий клеточную трансформацию, был назван src (сарк.). Эволюционное происхождение ретровирусных онкогенов было неясно до открытия положения о том, что ДНК как птиц [Stehelin D. et al., 1976], так и млекопитающих [Spector D. et al., 1978] содержат нуклеотидные последовательности, близкородственные (гомологичные) онкогену src ВСР. Обнаружение этих фактов вызвало к жизни два предположения: все…
Возможны два аспекта феномена: чисто количественные изменения с переходом количества в иное функциональное качество; качественные изменения: клеточная последовательность (протоонкоген) меняется под воздействием различных факторов. Эти два аспекта подробно будут рассмотрены позже в других разделах книги. В данный же момент важно сосредоточиться на центральном звене новой схемы канцерогенеза за счет активности онкогенов — на клеточных онкогенах….
Онковирусология последних лет явилась в известной мере истоком и одной из основ молекулярной онкологии как в методическом, так и в теоретическом плане. В процессе изучения молекулярных событий, происходящих при взаимодействии вирусных генов с клеточным геномом, были открыты важнейшие биологические феномены: интеграция геномов; обратный поток генетической информации (РНК-ДНК); трансдукция клеточных генов в вирусный геном. В конечном…
Мутагенный эффект HSV не связан с инсерцией вирусного генома в хозяйскую ДНК- В этой связи значительную важность приобретают исследования, направленные на идентификацию вирусных ферментов, способных участвовать в HSV-ин-дуцированном мутагенезе. Действие таких вирускодируемых ферментов может быть направлено на деградацию ДНК (например, щелочная экзонуклеаза — фосфатаза — или экзонуклеазная активность, ассоциированная с ДНК-полимеразой), а также на биохимические…
В культурах опухолевых клеток человека и животных была установлена необходимость для поддержания их малигнизированного статуса персистенции трансформирующих генов ретровирусов и паповавирусов. Подобная связь между малигнизацией и транс-формирующими генами HSV-2 пока не определена. Тем не менее многочисленные данные о взаимодействии генома HSV с ДНК инфицированных клеток позволили высказать предположение о причастности герпесвирусных онкогенов к стадии инициации…
