Как уже подробно рассматривалось включение в «работу» протоонкогенов и превращение их в активные онкогены имеют место при вирусном, химическом и так называемом спонтанном (неизвестного происхождения) канцерогенезах, что показано на примере разнообразных опухолей человека и животных. В ряде случаев химического канцерогенеза и при анализе опухолей человека продемонстрирована активация протоонкогенов суперсемейства src, например ras, erb В, raf,…
Использование методов переноса генов и молекулярного клонирования позволило установить некоторые наиболее важные, центральные детерминанты ракового процесса. Эти детерминанты — онкогены и их продукты — онкобелки, действующие как на структуру, так и на функции клеток, влияющие на регуляторные механизмы биохимических реакций. Многие из этих функций онкогенов и онкобелков пока неизвестны, однако при современном уровне знаний их…
R. Weinberg считает [Land H. et al., 1983], что выявленные по крайней мере 2 молекулярные ступени в процессе канцерогенеза обусловлены активацией ras-подобного и тус-подобного генов. Пока нет уверенности, что эти две ступени достаточны для превращения нормальной клетки в полностью компетентную опухолевую. Видимо, в этом процессе участвуют и другие системы. О такой возможности говорят следующие факты….
Внесение онкогена туе приводит к созданию фенотипа, который частично имитирует эффект установления культивирования клеток in vitro; добавление онкогена ras придает признаки образования фокусов и туморогенеза. Однако внесение туе и установление характеристик клеточной культуры создают идентичные изменения в поведении клеток. Нет прямых доказательств, что туе способен вызывать иммортализацию клеток, так же как неизвестно, зависит ли процесс…
Культура ЗТЗ-клеток сыграла свою, причем важную, роль. Она оказалась очень удобной для выявления отдельных онкогенов методом трансфекции, так как, будучи полутрансформированной, позволяла выявлять онкогены, способные осуществлять лишь отдельные, в большинстве заключительные, этапы формирования неопластического фенотипа. Дальнейшие исследования показали, однако, что система ЗТЗ-клеток позволяет выявлять лишь ограниченный участок общей цепи событий в канцерогенезе. В этом свете…
Главный вывод рассмотренной выше работы R. Weinberg и его сотрудников заключается в том, что онкогены ras и туе действуют по-разному, так как вместе они способны осуществить образование фенотипов, которые не способны индуцировать порознь. Создается впечатление, что их способ действия различается качественно и действие каждого направлено на разные клеточные мишени. Изучение онкогена туе до последнего времени…
Онкоген ras способен изменять морфологию КЭФ в монослоях и может также индуцировать рост колоний в мягком агаре. Он, однако, не способен индуцировать явные фокусы среди плотнорастущих нормальных клеток. КЭФ, трансформированные ras, проявляют очень ограниченную пролиферативную и туморогенную способность. Это отличает их от обладающих высокой туморогенной активностью На- и Ki-мышиных саркомных вирусов, которые транедуцируют очень близкородственные…
Трансфекция клона усеченного гена большого Т-антигена (одного) не оказывала какого-либо действия на морфологию монослоя КЭФ. Тот же результат дала котрансфекция с тус-клоном (pSVv-myc). Однако при котрансфекции этого клона измененного гена большого Т-антигена с EJ-ras появлялись многочисленные фокусы уже через 10 дней. При инокуляции фокусов контрансфецированных культур голым мышам появлялись быстрорастущие опухоли. В отличие от опухолей,…
Способность генов EJ-ras и туе кооперировать побудила R. Weinberg и его сотрудников испытать и другие комбинации генов (туе с N-ras и др.). Активный клон N-ras был в лаборатории R. Weinberg изолирован из клеток линии HL-60. N-ras и Ha-ras из EJ-линии кодируют сходные белки. Как и ожидалось, N-ras вел себя идентично с Ha-ras-геном в его способности…
Котрансфецированные (ras + туе) клетки были туморогенными при введении голым мышам или 12-дневным крысам, давая опухоли, которые росли до размера 1 см в диаметре за 2 нед после инокуляции. Блот-анализ образцов ДНК из опытных линий по Саузерну показал присутствие множественных копий обоих трансфецированных онкогенов, EJ-ras и v-myc. На основании этих опытов авторы сделали заключение, что…
