Важные данные по экспрессии с-опс-генов были получены при анализе их транскрипции в процессе эмбрио- и онтогенеза [Miiller R. et al., 1982; Miiller R., 1983]. В процессе эмбриогенеза и раннем периоде онтогенеза мышей была обнаружена постоянная транскрипция протоонкогенов c-Ha-ras и c-Ki-ras, а также тран-зиторная, в зависимости от типа ткани и стадии развития эмбриона, экспрессия протоонкогенов c-fos,…

Принципиальная возможность экспрессии онкогенов в фено-типически «нормальных» клетках впервые была показана в неин-фицированных фибробластах нескольких видов птиц, которые содержали РНК-транскрипты, гомологичные v-arc [Spector D. et al., 1978]. Экспрессия некоторых протоонкогенов в нормальных клетках не зарегистрирована, например c-mos [Gattoni S. et al., 1982; Miiller R. et al., 1982]. Транскрипция большинства других протоонкогенов в различных нормальных клетках…

Онкогены, изолированные из различных ретровирусов позвоночных, широко используются в настоящее время как пробы для обнаружения в геноме человека родственных последовательностей ДНК и, таким образом, выявления потенциальных опухолеродных генов (с-onc). Однако один лишь факт присутствия вирусных двойников в генетическом материале клеток человека и животных еще не доказывает их причинной роли в возникновении неоплазм, так как указанные…

Н. Land и соавт. (1983) в экспериментах по трансфекции показали, что v-myc при введении в реципиентные клетки NIH ЗТЗ, rat 1 или REF не вызывает их трансформации. Однако, когда клетки REF были трансфецированы двумя клонами ДНК, несущими вставки v-myc и Ha-ras одновременно, быстро выявлялись плотные очаги морфологически трансформированных клеток. Следовательно, действуя одновременно, туе и ras…

В предыдущем разделе были рассмотрены экспериментальные данные, свидетельствующие о принципиальной возможности кооперативного взаимодействия трансформирующего гена ras с вирусными онкогенами в процессе злокачественной трансформации нормальных клеток. Однако эти результаты не могут рассматриваться как адекватные в тех случаях канцерогенеза, при которых участие онкогенных вирусов не зарегистрировано. Особенно это относится к ДНК-содержащим вирусам, чьи онкогены в геноме нормальных…

Котрансфекция эмбриональных фибробластов онкогенами большим Т и ras приводила к критическим изменениям реципиентных клеток: в культуре REF быстро появлялись пролиферирующие фокусы трансформированных клеток. Эти фокусы роста состояли из трансформированных клеток, формирующих перевиваемые клеточные линии и опухоли у иммунодефицитных мышей. Таким образом, в этих экспериментах были получены доказательства недостаточности, «дефектности» одиночного трансформирующего гена ras в отношении…

R. Kamen и соавт. (1981) сконструировали клоны указанных генов путем получения их ДНК-копий в реакции обратной транскрипции трех ранних вирусных иРНК. Определение биологической активности клонов показало, что они обладают различными свойствами и эффектами, в результате чего удалось связать два клона со средним и большим антигенами. В экспериментах по трансфекции средний антиген индуцировал морфологические изменения и…

Как указывалось выше, современная схема канцерогенеза предполагает «кооперативное» действие нескольких онкогенов, так называемого «каскада» онкогенов. Ниже этот вопрос рассматривается более подробно. Кооперирование между трансформирующими генами и вирусными онкогенами. Взаимодействие ряда онкогенных ДНК-содержащих вирусов (вируса полиомы и аденовирусов) с клетками-мишенями сопровождается индукцией пролиферации инфицированных клеток. Стабильные клеточные линии (иммортализованные) были получены также путем трансфекции соответствующих реципиентных…

Единичное генетическое событие (точковая мутация), приводящее к образованию трансформирующих генов семейства ras, само по себе еще недостаточно для достижения злокачественного перерождения нормальных фибробластов. Необходимо другое повреждение (точная природа которого еще не установлена), способное к кооперированию с трансформирующим геном. В этом случае наступает кажущаяся «одностадийная» трансформация фибробластов, что в ее истинной сущности не противоречит общей модели…

Реципиентные клетки после трансфекции указанным препаратом ДНК приобретали способность к субстратиезависимой пролиферации, которая сохранялась свыше 30 пассажей клеток. Трансформирующий эффект препарата ДНК MOLT-4 снимался обработкой ДНКазой и некоторыми эндонуклеазами рестрикции, например Bgl II и ВатН I. Следует отметить, что в клеточной линии MOLT-4 ранее в экспериментах по трансфекции клеток NIH ЗТЗ был идентифицирован трансформирующий ген…