Первый трансформирующий ген человека

01.02.2011г.

Первый трансформирующий ген человека был обнаружен и охарактеризован во вторичных трансформантах клеток NIH ЗТЗ, инфицированных и трансформированных препаратами ДНК, изолированными из клеточных линий рака мочевого пузыря EJ [Parada L. et al., 1982], Т24 [Goldfarb M. et al., 1982; Taparowsky E. et al., 1982] и J-82 [Der D. et al., 1982].

Позднее было установлено, что EJ, T24 и некоторые другие опухолевые клеточные линии, например J-82, не представляют собой независимые клеточные линии [OToole C.-et al., 1983], а являются перекрестно-контаминированными.

Характерной особенностью трансформирующих генов клеток опухолевых линий EJ и Т24 является то, что они в нескольких циклах трансфекции были устойчиво ассоциированы со специфическими для человеческой ДНК Alu-последовательностями, причем каждый последующий цикл трансфекции значительно повышал эффективность трансформации клеток NIH ЗТЗ препаратом ДНК (препараты ДНК брали из фокусов трансформации последовательных циклов трансфекции).

С помощью молекулярного клонирования в бактериофаге, где в качестве «зонда» использовались Alu-последовательности, присутствующие в качестве вставки в pBR-322 (проба BLUR-8), и последующего реклонирования ВатН I фрагмента размером 6,6 т. п. о. в плазмиде pBR-322 трансформирующий ген был получен в «чистом виде».

«Молекулярная онкология»,
И.Ф. Сейц, П.Г. Князев



Смотрите также: