Наблюдается значительная консервативность всей аминокислотной последовательности между гомологичными ras-генами у отдаленных видов животных. Так, Ha-ras-ген человека отличается от вирусного Ha-ras-гена, имеющего крысиное происхождение, лишь тремя (из 189) остатками аминокислот. Сходно с этим человеческий Ki-ras-ген (состоящий из 4 экзонов: I, II, III и IV) отличается от вирусного Ki-ras-гена, также имеющего крысиное происхождение, лишь 7 из 189…
К. Shimizu и соавт. (1983) анализировали структуру онкогена Ki-ras в линии клеток Calu-1 карциномы легкого человека. По их данным, гомолог вирусного онкогена Кирстен-ras (v-Ha-ras), найденный в клеточной линии Calu-1 карциномы легкого человека, имеет интрон-экзонную структуру, сходную с таковой человеческого гомолога вирусного гена Харвей-ras (v-Ha-ras). Второй, потенциально 4-й кодирующий экзон присутствует в Ki-ras-гене человека, и сходные…
S. Rasheed и соавт. (1983) определили нуклеотидную после-довательность онкогена штамма Рашид вируса саркомы крыс (RaSV). Онкоген кодирует трансформирующий белок р29 (29 кд), отличающийся от иммунологически родственного ему белка р21 вируса мышиной саркомы Харвея по структуре N-конца и тем, что имеет дополнительные мутации на карбоксиконце. Крысиный саркомный вирус штамма :Рашид интересен в том отношении, что возник…
Анализ показал, что гены содержат, по крайней мере, 4-экзона и только единственная точковая мутация, находящаяся в 1-м экзоне, различает кодирующую область обеих аллелей нормального гена от их активированного партнера. Оба варианта гена кодируют белок, который отличается от соответствующего продукта вирусного гена по трем аминокислотным остаткам, один из которых, как было показано ранее, представляет главный сайт…
D. Capon и соавт. установили, что: единственный нуклеотид в кодоне 12 отличает области ДНК, кодирующие белок р21; триплет ГГТ, кодирующий глицин в позиции 12 продукта нормального гена c-Ki-ras 2, становится в результате мутации ГТТ, кодирующим валин в клетках SW480 (карцинома толстой кишки), и ТГТ, кодирующим цистеин в клетках Calu-1 (карцинома легкого); второе различие в нуКлеотидах…
J. Grath и соавт. (1983) показали, что c-Ki-ras 2 потенциально кодирует 2 различных белка р21 (молекулярная масса 21 000) путем дифференциального использования двух из пяти его кодирующих экзонов. Оставалось неясным, какой из этих белков (или оба) обладает трансформирующей активностью. Как видно из изложенного выше, активация гена c-Ha-ras 1 в клетках Т24 карциномы мочевого пузыря человека,…
Глициновые остатки известны своей способностью изменять а-спиральную структуру белков. Авторы определили, что N-терминальная часть белка р21, кодированного геном с-has/bas-l, содержит 2 а-спиральные области из 10 и 13 аминокислот, соединенные петлей из 7 аминокислот. Петлевидная структура придает гибкость при сгибании и складывании полипептидной молекулы. Если глицин в положении 12 белка р21 заменен валином, то размер петлевой…
Е. Reddy и соавт. (1982) отмечают общее генетическое изменение в человеческом и ретровирусных трансформирующих генах. По их данным, сравнение первых 37 аминокислот белка р21, кодируемого нормальным геном человека с-has/bas-l, с их ретровирусным партнером показало полную идентичность, кроме позиции 12, т. е. аминокислоты, которая изменена в Т24. В белке р21, кодируемом Ha-MSV, в этом положении присутствует…
Замена в плазмиде Т24-СЗ-фрагмента ДНК, локализованного между сайтами расщепления Xho I и Крп I, нормальными последовательностями полностью лишала его трансформирующей активности. Напротив, замена нормальной Xho I-Kpn I-области ДНК в pbc-N I (плазмида, содержащая фрагменты клеточного протоонкогена) соответствующим доменом плазмиды рТ24-СЗ, генерировала плазмиду (рХКТ-82), которая трансформировала клетки NIH ЗТЗ. С помощью этой же генно-инженерной техники обмена…
Исследование в Национальном раковом институте выполнили Е. Reddy и соавт. (1982). Авторы проанализиро-вали генетические изменения, происходящие в ткани мочевого пузыря человека при ее неопластическом перерождении, исследовали нормальную ткань и клеточную линию Т24 карциномы мочевого пузыря, обнаружили точковую мутацию в протоонкогене при его активации в онкоген. При этом, как и в изложенной выше работе С. Tabin…
