Синтез провирусной ДНК (Уникальность ДНК-полимеразы)

Уникальность ДНК-полимеразы ретровирусоз заключается в том, что ее природными матрицами являются молекулы РНК. Однако для реакции обратной транскрипции присутствия матрицы недостаточно. Образование провируса происходит лишь в том случае, если в реакции участвуют соответствующие молекулы РНК-затравки [Harada F. et al., 1979; Varmus H. et al., 1979; Gerard G., Grandgenett D., 1980]. Как и все известные ДНК-полимеразы, обратная транскриптаза представляет собой функционально «затравказависимый» фермент.

Наиболее эффективными затравками для действия фермента оказались синтетические гомополимерные матрицы (олигодезоксирибонуклеотиды), например поли (рЦ), олиго (дГ) и некоторые другие [Gerard G., Grandgenett D., 1980; Varmus H., Swanstrom R., 1982]. Естественными же затравками для работы фермента служат определенные тРНК. In vitro в различных системах обратной транскрипции иРНК вирусов и клеток эукариотов могут использоваться уникальные структурные свойства самих матриц для получения ДНК транскрипта с их определенного участка.

Так, наличие полиаденилатного тракта на З-конце иРНК позволяет в присутствии затравки олиго (дТ) синтезировать гетерополимерные участки, следующие за поли (An) [Gerard G., Grandgenett D., 1980; Boone L., Skalka A., 1981]. Широкоиспользуемой затравкой для синтеза высокопредставительной копии гетерологичных иРНК служат олигонуклеотиды ДНК тимуса теленка (статистические, усредненные, «rendom primers»).

Большое влияние на процесс транскрипции матрицы оказывают очистка ДНК-полимеразы от РНКаз, гидролизующих матрицу, и концентрации каждого дезоксирибонуклеозидтрифосфата в реакции [Varmus H. et al., 1979; Gerard G., Grandgenett D., 1980].

«Молекулярная онкология»,
И.Ф. Сейц, П.Г. Князев

• Вирус HTLV
• Данные, касающиеся диагностики, лечения и профилактики ATL
• Роль вирусов герпеса в возникновении некоторых форм неопластических заболеваний человека
• Отсутствие хорошо охарактеризованных делеционных мутантов HSV
• Молекулярный механизм малигнизирующего действия вирусов
• Определение трансформирующей активности клонированных фрагментов
• Трансформирующие гена HSV-2 штамма 333
• Полученные на экспериментальных моделях
• Поддержание малигнизированного статуса персистенции трансформирующих генов ретровирусов и паповавирусов
• Мутагенный эффект HSV
• Онковирусология последних лет
• Механизмы вирусного лейкомогенеза у млекопитающих и человека
• Роль онкогенных вирусов в возникновении опухолей человека
• Недавние вирусологические и эпидемиологические исследования
• Анализ эпидемиологических данных
• Онкогены вирусов сарком кошек (FeSV): fes, fins, sis, abl
• Инкубация антисыворотки TBR