Главная / Молекулярная онкология / Онкогены опухолей человека и животных / Высокомолекулярные образцы ДНК из нормальных клеток птиц и человека

Высокомолекулярные образцы ДНК из нормальных клеток птиц и человека

Следует особо отметить, что высокомолекулярные образцы ДНК из нормальных клеток птиц и человека (контроли) не способны вызывать трансформацию клеток NIH ЗТЗ. Однако эти же, но фрагментированные (размер фрагментов ^ 0,5—5,0 т. п. о.) препараты ДНК лимфоцитов кур и человека индуцируют, правда, с очень низкой частотой (< 0,002 очага трансформации/мкг ДНК/Ю6 клеток) злокачественную трансформацию реципиентной культуры [Cooper G., Lane M.-A., 1984; Schafer R. et al., 1984]. Эти данные свидетельствуют о том, что в принципе в нормальной клетке существуют гены, способные индуцировать неопластическую трансформацию.

Молекулярный анализ трансформантов клеток NIH ЗТЗ, получаемых после трансфекции препаратами ДНК из опухолей человека, значительно упростился после открытия и выделения уникальных клонов умеренно повторяющихся последовательностей генома человека (семейство Alu, Kpn, BamH I).

Наличие подобных последовательностей в ДНК трансформантов, определяемых гибридизацией соответствующих плазмид с ДНК реципиентных клеток, оказалось уникальным маркером переноса человеческой генетической информации (например, Alu-последовательностей) в геном мышиных клеток NIH ЗТЗ. Вероятность подобного события достаточно велика, поскольку в геноме человека примерно 5-Ю5 умеренно повторяющихся Alu-последовательностей приходится на единичные копии уникальных генов [Goldfarb M. et al., 1982].

Как правило, проводятся 2—3 последовательных цикла трансфекции клеток NIH ЗТЗ для того, чтобы удалить последовательности донорской ДНК, генетически не связанные с трансформирующими генами.

«Молекулярная онкология»,
И.Ф. Сейц, П.Г. Князев



Смотрите также: